作者：雷晓燕　熊海金　赵一方　张宏
    单位：雷晓燕(730000　兰州，甘肃省人民医院小儿科)；熊海金(730000　兰州，甘肃省人民医院小儿科)；赵一方(730000　兰州，甘肃省人民医院小儿科)；张宏(730000　兰州，甘肃省人民医院小儿科)

　　近年来，由于交通的发展和现代装饰材料的普及，使居民生活环境受到了不同程度的铅污染，这些污染对儿童的健康构成了严重的威协。铅暴露不仅可造成儿童脑及神经发育的毒性^［1］，还可引起厌食^［2］、抗氧化功能的改变^［3］。自1998年5月～6月，对兰州市某工厂幼儿园的70名儿童做血铅测定的同时，进一步检测了肾功能，分析其相关性。现报道如下。
　　对象　　被检儿童来自兰州市某工厂(铅污染较重区域)附近的一所幼儿园，共70例，其中男性34例，女性36例，年龄为4～6岁，平均(5.2±1.0)岁，所在区域大气及土壤中测试铅水平分别为7.8μg/m³和（101±65）mg/kg，超过国家标准的5.2倍(大气铅含量为1.5 μg/m³/季度)。
　　方法
　　1.血铅测定：用无火焰原子吸收光谱法。取静脉血0.1 ml加入0.1 NHNO₂ 215 μl，离心后取上清液2 μl导入Varian-Techtron PE-5100型原子光度仪的石墨炉原子化，进行铅浓度定量，从标本采样到进样的全过程均采用严格处理的无铅器皿。根据1991年美国CDC标准，不管有无临床症状及血生化的改变，只要血铅≥100 μg/L者则诊断为铅中毒。
　　2.血、尿β₂-微球蛋白(β₂-MG)测定：清晨抽取静脉血1 ml，尿标本留除晨尿以外的任意尿约10 ml，用0.1的NaOH调pH至7.0左右，两者均置于-20℃保存，集中检测，采用北方免疫试剂所提供的放射免疫试剂盒，操作按说明书进行，测定仪器为FJ2008自动γ免疫计数器。儿童参考值：血β₂-MG （2.2±0.7）μg/ml；尿β₂-MG＜0.4 μg/ml。
　　3.尿乙酰β-D-葡萄糖苷酶(NAG)测定：用任意一次新鲜中段尿离心后取上清液，由保定长城临床试剂公司提供的试剂盒，以2-氯-4-硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(CNP-NAG糖苷)为底物，在日立SABA 18型生化自动分析仪上作连续监测法测定，波长405/485 nm，吸样18 μl，底物工作液350 μl，温度37℃，反应进入线性阶段后连续监测吸光度变化，微机自动计算吸光度每分钟变量，换算成单位(U/L)，正常参考值为＜30 U/L。用同一份尿样同时测定肌酐浓度，以每毫摩尔肌酐比值［U/（mmol·Cr) (Cr代表肌酐)］表示，采用碱性苦味酸速率法。
　　4.NAG/Cr比值测定：为减少尿量变化对浓度的影响，常规分析结果以尿酶单位与尿肌酐比值方式表示［U/（mmol·Cr)尿NAG(U/L)/尿肌酐(mmol/L)=NAG U/（mmol·Cr）］。正常比值：2.37 U/（mmol·Cr），此反映尿NAG的排出率，4～6岁儿童约为21.31 U/（mmol·Cr）。
　　5.统计学处理：利用statistic 统计软件在586计算机上处理各项数据并进行描述性统计分析，因整体数据呈偏态分布，故而将数据进行对数处理，然后再做相关性分析及t检验。
　　结果
　　1.血铅含量及各项肾功能指标：在70例小儿中，血铅≥100 μg/L者62例，其中男32例，女30例。血铅最大值393.6 μg/L，最小值189.19 μg/L，标准差75.27 μg/L，几何均值159.24 μg/L，中位数160.79 μg/L，呈偏态分布，男女性别间差异无显著性(表1)。
    表1　各指标描述性统计分析(n=70)
    表2　血铅与肾功能各项指标相关分析
    表3　NAG/Cr的 t检验
　　2.血铅含量与肾功能各指标的相关性：血铅水平与尿NAG活性成正相关(r=0.244,P＜0.05)，与NAG/Cr比值亦呈正相关关系(r=0.473)P＜0.001，而血铅与血、尿β₂-MG、尿Cr、尿微量蛋白等无明显相关性(表2)。
　　3.血铅水平与NAG/Cr［U/(mmol·Cr)］比值间的关系：血铅含量≥200 μg/L 31例，其NAG/Cr的±s为1.667±1.121，＜200 μg/L的39例，其NAG/Cr的±s 为0.781±0.423，两组间差异有显著性 (t=4.166)，P＜0.01，见表3。
　　讨论
　　1.铅污染区儿童的血铅含量：我们调查的兰州市某工厂幼儿园位于铅污染较严重区域，它与储电池厂紧紧相邻，对面50米处有一造漆厂，幼儿园面临交通干线，环境铅污染处于十分严重的状态。我们对该幼儿园4～6岁的70例儿童进行了血铅含量测定，结果发现，除8例小儿血铅水平＜100 μg/L外，余62例血铅水平均≥100 μg/L，铅中毒的发生率为89%，8例血铅＜100 μg/L的儿童，据调查均为经常不上幼儿园的小孩。
　　2.血铅与NAG的相关性：NAG是存在于肾小管及尿路上皮中的溶酶体之一，属酸性水解酶。以近曲小管含量最丰富，其分子量较大，通常不能被肾小球滤过，肝、脾、肺、脑等组织也有此酶，但不受血中酶的干扰，其活性又不易受尿中细胞和细菌等影响，冷藏条件下保存数日不失活，故对诊断肾损伤及估计其受损程度很有临床价值^［4］。本组检测了70例小儿血铅水平，其最大值为393.6 μg/L,最小值为39.1 μg/L，均值189.2 μg/L，将其血铅≥200 μg/L与＜200 μg/L的儿童分别计算出相应的尿NAG排出率(NAG/Cr对数)，结果发现，血铅≥200 μg/L小儿，尿NAG排出率与NAG/Cr比值均明显增高，与血铅水平有显著性相关性(P＜0.01)，血铅含量每上升50 μg/L时，尿NAG排出率增加6.8%(以NAG/Cr比值计算)，Verberk等^［5］亦报道了151例小儿血铅均值为342 μg/L，发现血铅水平每上升100 μg/L，尿NAG活性增加13.5%，本研究结果与 Verberk 报道等^［5］的数据基本相符，说明血铅浓度达一定程度时(≥200μg/L以上)就可引起肾脏的损害。我们检测的70例小儿，尿Cr均在正常范围之内，可能是尿Cr值常受尿量，尿pH、尿色原等因素的影响，故临床上一般忽略不计，若留取24h或一定时间范围的尿计算尿量有许多困难，用任意一次尿若以容量单位报告尿酶活性(U/ml或U/L)则误差较大，因此临床应用中仍以肌酐比值法计算酶排出率较为可靠。我们认为，该研究首次表明了环境铅暴露对小儿肾脏的损害，未发现血铅与反映肾小管重吸收作用的血、尿β₂-MG，尿微量蛋白等之间的关系，可能表示肾小管损伤尚未妨碍正常的蛋白重吸收，环境铅致小儿血铅升高引起NAG排泄增加，为今后的病理学研究提供了依据。基金项目：甘肃省九七科技攻关项目（GK972-2-41A）
    参考文献
    1，符邵莲，郑国庆，胡江，等. 铅的神经发育毒性评价方法的研究. 癌变、畸变、突变，1997， 9：7-9.
    2，王郁文，李宏向，朱慧芬，等. 铅与小儿厌食症的关系探讨. 中国实用儿科杂志，1995，10：54.
    3，俞苏蒙. 环境铅接触对学龄儿童血脂质过氧化和超氧化歧化酶影响的研究. 职业医学，1995，4：7-8.
    4，王淑娟，周惠平，夏铁安. 现代实验诊断学手册.北京： 北京医科大学 中国协和医科大学联合出版社， 1995.354-355.
    5，Verberk MM, Willems TZP, Verplanke AJW, et al. Environmental lead and renal effects in children. Arch Environ Health, 1996, 51:83-87.
(收稿日期：1999-10-12)